沙門(mén)氏菌屬是全球主要的食源性病原體之一。該屬由2600多種不同的血清型組成，即鼠傷寒沙門(mén)氏菌和腸炎沙門(mén)氏菌，它們主要導致人類(lèi)沙門(mén)氏菌病病例。
沙門(mén)氏菌可以存在于多種食物中，但雞蛋和肉類(lèi)等家禽產(chǎn)品是食物鏈中的主要來(lái)源。
雞肉的生產(chǎn)具有戰略意義，因為它是最經(jīng)濟的肉類(lèi)之一，也是全球消費量最大的肉類(lèi)之一。歐盟在2022年生產(chǎn)了 980 萬(wàn)噸雞肉，并從巴西、泰國和烏克蘭進(jìn)口了高價(jià)值家禽產(chǎn)品，包括胸肉和家禽制品。歐盟在第1086/2011號法規 （EC）確定了25克新鮮禽肉中不含鼠傷寒沙門(mén)氏菌和腸炎沙門(mén)氏菌的標準。
因此，及時(shí)檢測沙門(mén)氏菌十分重要。
現有的基于 DNA 的技術(shù)檢測方法的一個(gè)典型局限性是它們無(wú)法區分活的微生物和非活的微生物。然而噬菌體可以專(zhuān)門(mén)感染和復制活細菌細胞，噬菌體僅在存在目標細菌時(shí)繁殖，而不是檢測細菌本身，因此基于噬菌體的檢測可以?xún)H僅檢測活菌。
此外，單個(gè)噬菌體感染每個(gè)細菌細胞會(huì )產(chǎn)生數十到數百個(gè)新的病毒顆粒，從而提高了相同范圍內該方法的檢測限。
在本研究中，作者利用沙門(mén)氏菌噬菌體vB_SenS_PVP-SE2 (PVP-SE2) 結合LAMP擴增開(kāi)發(fā)了一種新的腸炎沙門(mén)氏菌檢測方法，噬菌體PVP-SE2的潛伏期為 15分鐘，上升期為15分鐘，每個(gè)感染細胞平均有240個(gè)后代噬菌體，能夠縮短檢測沙門(mén)氏菌所需的富集期。因此，該方法允許在同一天 （8 h） 檢測活細胞。并將該方法在加標雞胸肉樣品中進(jìn)行了評估。
圖 1 熒光可視化圖片
結論：該研究成功開(kāi)發(fā)了用于檢測雞胸肉中活腸炎沙門(mén)氏菌的PA-LAMP 測定法。在大約8小時(shí)內，包括樣品預富集、DNA 提取和LAMP，可以檢測到 1.1 CFU/25 g 的食品樣品。這使得該方法適用于當天檢測。此外，熒光可視化方法的開(kāi)發(fā)允許該方法應用于現場(chǎng)檢測?？偠灾?，本研究開(kāi)發(fā)了一種新的、快速的、簡(jiǎn)單的、非技術(shù)要求高且經(jīng)濟的方法，可以在同一個(gè)工作日內檢測出活腸炎沙門(mén)氏菌，其結果與參考方法（ISO 6579）相當。
參考來(lái)源：Lamas A, Santos SB, Prado M, Garrido-Maestu A. Phage amplification coupled with loop-mediated isothermal amplification (PA-LAMP) for same-day detection of viable Salmonella Enteritidis in raw poultry meat. Food Microbiol. 2023 Oct;115:104341. doi: 10.1016/j.fm.2023.104341. Epub 2023 Jul 11. PMID: 37567642.
來(lái)源：微生物安全與健康網(wǎng)，作者~翟慧潺。
