微生物檢測凍干質(zhì)控菌種鼠李糖乳桿菌使用說(shuō)明
1、 復蘇鼠李糖乳桿菌種前應準備適于該菌種生長(cháng)的培養基和培養設備,所有操作均應在符合生物安全保護及無(wú)菌條件下進(jìn)行。
2、 啟開(kāi)鼠李糖乳桿菌菌種前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面。在無(wú)菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開(kāi)塑蓋,撕開(kāi)鋁蓋,打開(kāi)西林瓶膠塞,加入復蘇液(購買(mǎi)菌株包裝中提供),將鼠李糖乳桿菌凍干菌種(干粉)制成懸浮液,然后用無(wú)菌滴管或移液器吸取適量,移至非選擇性固體培養基平板(或液體培養基)上(除特殊情況或特別推薦外),按推薦的培養條件進(jìn)行培養和傳代保存(詳見(jiàn)附表“凍干菌種的復蘇培養和傳代保存”)。
3、 有個(gè)別凍干菌種(如弧菌屬、乳桿菌屬等)復蘇速度較慢,可按2操作后,同時(shí)將菌懸液置推薦的培養條件培養過(guò)夜,再選用適合該菌種生長(cháng)的選擇性培養基進(jìn)行分離,操作見(jiàn)4。
4 、培養后觀(guān)察菌種的生長(cháng)情況,并檢查其純度,如發(fā)現純度不能滿(mǎn)足要求時(shí),應選用適合該菌種生長(cháng)的選擇性培養基進(jìn)行分離,并按推薦的培養條件進(jìn)行培養,培養后觀(guān)察目標菌的菌落特征與生化特征,挑取典型菌落做純培養后再使用。
5、 本品為一次性用品,開(kāi)啟之后不宜反復使用或保存,暫不使用時(shí),建議4℃保藏。
6、 復蘇后的菌種一般宜傳代(如:斜面傳代)2~3次后使用,菌種傳代5次后建議棄置。
7 、鼠李糖乳桿菌購買(mǎi)后應在保質(zhì)期內使用。
注):購買(mǎi)后如發(fā)現菌種異?;蛭廴镜惹闆r,請在購買(mǎi)之日起1個(gè)月內與我們聯(lián)系。
凍干菌種鼠李糖乳桿菌復蘇示意圖:
附表 凍干質(zhì)控菌種的復蘇培養和傳代保存 菌種名稱(chēng) 復蘇液 (包裝中提供) 復蘇培養基 培養條件 保存溫度 轉接 頻率 備注 大腸埃希氏菌、沙門(mén)氏菌、志賀氏菌 腦心浸液培養基 營(yíng)養瓊脂(022020) 36℃±1℃ 24h~48h 2~8℃ 一個(gè)月 阪崎腸桿菌、陰溝腸桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌 肺炎克雷伯氏菌、粘質(zhì)沙雷伯氏菌 變形桿菌、弗氏檸檬酸桿菌 小腸結腸炎耶爾森氏菌 葡萄球菌、微球菌、馬紅球菌、芽胞桿菌 假單胞菌、氣單胞菌屬 腦心浸液培養基 營(yíng)養瓊脂(022020) 36℃±1℃ 24h~48h 25℃ 一個(gè)月 熒光假單胞菌 腦心浸液培養基 營(yíng)養瓊脂(022020) 25℃-30℃ 24h~48h 25℃ 一個(gè)月 腸球菌、鏈球菌 腦心浸液培養基 血平板(024070) 36℃±1℃ 24h~48h 2~8℃ 半個(gè)月 李斯特氏菌 腦心浸液培養基 胰蛋白胨大豆酵母浸膏脂 (TSA-YE) (026020) 36℃±1℃ 24h~48h 2~8℃ 一個(gè)月 梭菌 腦心浸液培養基 皰肉牛肉粒肉湯(027140)或梭菌増菌肉湯(027145)或哥倫比亞血平板(CP0160) 36℃±1℃ 48h~72h厭氧培養 2~8℃ 厭氧環(huán)境 半個(gè)月 接種皰肉牛肉粒肉湯后加無(wú)菌液體石蠟(029110)高約1cm。 霍亂弧菌、擬態(tài)弧菌 堿性蛋白胨水 堿性瓊脂(025040) 36℃±1℃ 24h~48h 25℃ 一個(gè)月 其它弧菌(副溶血性弧菌、創(chuàng )傷弧菌、河流弧菌、溶藻弧菌等) 3%NaCl堿性蛋白胨水 3%NaCl營(yíng)養瓊脂 或3%NaCl TSA (025043) 36℃±1℃ 24h~48h 25℃ 一個(gè)月 霉菌、念珠菌、酵母菌 沙氏葡萄糖液體培養基 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA)(021050) 26℃±1℃ 2d~5d 2~8℃ 兩個(gè)月 空腸彎曲菌 布氏肉湯 血平板(024070) 42±1℃ 42±1℃48h~72h微需氧 2~8℃ 微需氧 一周 雙歧桿菌 TPY肉湯 雙歧桿菌瓊脂(027330) 36℃±1℃ 48h~72h厭氧培養 2~8℃ 厭氧環(huán)境 一周 其它乳酸菌(乳酸桿菌、乳酸桿菌亞種、嗜熱乳酸鏈球菌) MRS肉湯或脫脂乳溶液 滅菌脫脂乳或 MRS瓊脂(027315) 36℃±1℃ 24h~48h 2~8℃ 一周 嗜血桿菌屬、奈瑟氏菌屬 腦心浸液培養基 巧克力平板培養基 (普通)(029032) 36℃±1℃ 48h~72h 5~10%CO2環(huán)境 2~8℃ 5~10%CO2 環(huán)境 一周 軍團菌 腦心浸液培養基 BCYE平板 (CP0020) 36℃±1℃ 4d~7d 2~8℃ 一個(gè)月 轉接時(shí)用一次性接種環(huán),不能使用酒精燈;如使用平板轉接,培養時(shí)建議用牛皮紙或報紙包好,避免平板失水變干。