一種檢測面粉中VBNC鼠傷寒沙門(mén)氏菌的方法
發(fā)布時(shí)間：2024-11-18 瀏覽次數：487
面粉中的沙門(mén)氏菌引起的感染
根據美國食品藥品監督管理局（FDA）和疾病控制與預防中心 (CDC) 的報告，在2023年，一種與面粉消費相關(guān)的沙門(mén)氏菌爆發(fā)導致了全美13個(gè)州的14例感染病例。此外，從2017年至2022年，生面團因受到沙門(mén)氏菌或大腸桿菌O157：H7污染而導致召回或爆發(fā)事件達22起。這些事件顛覆了面粉干燥性質(zhì)使其成為低風(fēng)險成分的普遍誤解。事實(shí)證明，細菌病原體如沙門(mén)氏菌和大腸桿菌O157：H7可以在小麥粉中長(cháng)期存活。
檢測面粉中沙門(mén)氏菌的重要性
在面粉中檢測病原體非常復雜，特別是當它們進(jìn)入活但非培養可得（VBNC）狀態(tài)時(shí)。在這種狀態(tài)下，細菌仍保持代謝活性但無(wú)法通過(guò)常規平板法檢測到，這給公共衛生和食品安全帶來(lái)了重大風(fēng)險。已知這些細菌能夠在VBNC狀態(tài)下維持其致病性，因而微生物監測和確保食品安全的準確快速檢測方法得到了人們的關(guān)注。
ddPCR和DNA嵌入染料檢測沙門(mén)氏菌
該研究[1]使用ddPCR結合DNA嵌入染料的方法，成功地檢測了沙門(mén)氏菌的invA基因，并量化了其在不同環(huán)境條件下的存活狀態(tài)。該方法不僅能夠評估細胞的活力，還能夠與傳統的qPCR和計數方法進(jìn)行比較，為食品加工和儲存中的微生物污染提供了新的見(jiàn)解。此外，該研究還發(fā)現了DNA嵌入染料的有效性和靈敏度，以及它們在區分活細胞和死細胞方面的潛力。
圖1 ddPCR對10倍稀釋的pDNA中S.Typhimurium的invA基因進(jìn)行定量
圖2比較平板計數法和DNA-染料活細胞檢測法（包括PMA、DyeTox13、DyeTox13+EMA，以及無(wú)處理）的結果。在不同劑量的沙門(mén)氏菌濃度下，在不同的儲存溫度下對沙門(mén)氏菌進(jìn)行培養，并測試其生理狀態(tài)。（A）、（B）和（C）分別指在4℃、25℃和37℃下培養的面粉樣品，并通過(guò)ddPCR進(jìn)行檢測。
總結：該研究為食品加工和儲存中的微生物污染提供了新的見(jiàn)解，但仍需要進(jìn)一步的研究來(lái)確定其他細菌株在不同環(huán)境條件下的存活狀態(tài)。此外，該研究還需要更多的實(shí)驗來(lái)驗證其方法的可靠性和準確性。然而，該研究的結果表明，ddPCR結合DNA嵌合染料的方法具有巨大的潛力，可以成為一種快速、敏感、成本效益高且易于使用的檢測食品中病原體及其VBNC狀態(tài)的方法。這將有助于降低食品安全風(fēng)險并改善公共衛生。
參考文獻：[1]LI L, BAE S. Quantitative detection and survival analysis of VBNC Salmonella Typhimurium in flour using droplet digital PCR and DNA-intercalating dyes [J]. Microbiology Spectrum, 2024.
來(lái)源：微生物安全與健康網(wǎng)，作者~黃玲。
