食品中雙歧桿菌檢驗的解決方案 GB 4789.34-2012-廣東環(huán)凱微生物

食品中雙歧桿菌檢驗的解決方案 GB 4789.34-2012

發(fā)布時(shí)間：2014-10-31 瀏覽次數：6591 分享：

我公司針對目前乳制品行業(yè)及質(zhì)量監測單位檢驗雙歧桿菌的需求及情況，對雙歧桿菌檢驗相應的培養基進(jìn)行了改進(jìn)，使得雙歧桿菌檢出率較之前有很大的改進(jìn)。擴充并完善了相關(guān)的微生物檢測試劑，使得技術(shù)操作人員能更準確、快捷的檢測出目標菌。

現我公司，依據GB 4789.34-2012食品衛生微生物學(xué)檢驗雙歧桿菌檢驗，推出成套的雙歧桿菌檢驗解決方案，為生產(chǎn)企業(yè)及檢驗單位提供方便。

GB 4789.34-2012雙歧桿菌檢驗流程圖

圖1：GB 4789.34-2012雙歧桿菌檢驗流程圖

表1：實(shí)驗操作所用培養基及生化試劑

功能階段	實(shí)驗序號	產(chǎn)品序號	產(chǎn)品名稱(chēng)	規格	類(lèi)別
稀釋液	1	CP0630	生理鹽水	225mL×10袋	盒（袋裝）
平板分離	2	027330	雙歧桿菌瓊脂培養基（BBL瓊脂培養基）	250g	瓶（干粉）
生理生化	3	029010	革蘭氏染色液	10mL×4支	盒
4	029161	過(guò)氧化氫酶試劑	2mL×10支	盒（西林瓶）
5	027340	PYG液體培養基基礎	250g	瓶（干粉）
SR0300	PYG液體培養基配套試劑（A、B各一支添加于100 ml基礎培養基中）	2種×5支/盒	盒（西林瓶）
6	027350	TPY液體培養基	250g	瓶（干粉）
7	029010	革蘭氏染色液	10mL×4支	盒
8	029080	甘油	2mL×10支	盒（西林瓶）
9	075060	D-阿拉伯糖	20支	盒（西林瓶）
10	075400	D-核糖	20支	盒（西林瓶）
11	075070	D-木糖	20支	盒（西林瓶）
12	075080	D-半乳糖	20支	盒（西林瓶）
13	075010	D-葡萄糖	20支	盒（西林瓶）
14	075550	D-果糖	20支	盒（西林瓶）
15	075380	D-甘露糖	20支	盒（西林瓶）
16	075110	L-鼠李糖	20支	盒（西林瓶）
17	075100	衛矛醇	20支	盒（西林瓶）
18	075120	肌醇	20支	盒（西林瓶）
19	075040	甘露醇	20支	盒（西林瓶）
20	075090	山梨醇	20支	盒（西林瓶）
21	075160	七葉靈（七葉苷）	20支	盒（西林瓶）
22	075140	水楊甙（水楊苷，水楊素）	20支	盒（西林瓶）
23	075570	D-纖維二塘	20支	盒（西林瓶）
24	075030	D-麥芽糖	20支	盒（西林瓶）
25	075020	D-乳糖	20支	盒（西林瓶）
26	075560	D-蜜二糖	20支	盒（西林瓶）
27	075050	D-蔗糖	20支	盒（西林瓶）
28	075530	D-海藻糖（覃糖）	20支	盒（西林瓶）
29	075540	菊糖（菊根粉）	20支	盒（西林瓶）
30	075430	D-松三糖	20支	盒（西林瓶）
31	075230	D-棉籽糖	20支	盒（西林瓶）
32	075480	淀粉	20支	盒（西林瓶）
33	075420	D-松二糖	20支	盒（西林瓶）

GB 4789.34-2012食品衛生微生物學(xué)檢驗雙歧桿菌檢驗操作步驟

1 樣品制備

1.1 樣品的全部制備過(guò)程均應遵循無(wú)菌操作程序。

1.2 以無(wú)菌操作稱(chēng)取25 g(mL)樣品，置于裝有225 mL 生理鹽水的滅菌錐形瓶?jì)?，制?:10 的樣品勻液。

2 稀釋及涂布培養步驟

2.1 用1 mL 無(wú)菌吸管或微量移液器吸取1:10 樣品勻液1.0 mL，沿管壁緩慢注于裝有9 mL 生理鹽水的無(wú)菌試管中(注意吸管尖端不要觸及稀釋液)，振搖試管或換用1 支無(wú)菌吸管反復吹打使其混合均勻，制成1:100 的樣品勻液。

2.2 另取1 mL 無(wú)菌吸管或微量移液器吸頭，按5.2.1 操作順序，做10 倍遞增樣品勻液，每遞增稀釋一次，即換用1 次1 mL 滅菌吸管或吸頭。

2.3 根據待鑒定菌種的活菌數，選擇三個(gè)連續的適宜稀釋度，每個(gè)稀釋度吸取0.1 mL 稀釋液，用L棒在雙歧桿菌瓊脂平板進(jìn)行表面涂布, 每個(gè)稀釋度作兩個(gè)平皿。置36 ℃±1 ℃ 溫箱內培養48 h±2 h，培養后選取單個(gè)菌落進(jìn)行純培養。

3 純培養

挑取3 個(gè)或以上的菌落接種于雙歧桿菌瓊脂平板，厭氧，36 ℃±1 ℃ 培養48 h。

4 鏡檢及生化鑒定

4.1 涂片鏡檢

雙歧桿菌菌體為革蘭氏染色陽(yáng)性，不抗酸、無(wú)芽孢，無(wú)動(dòng)力，菌體形態(tài)多樣，呈短桿狀、纖細桿狀或球形，可形成各種分支或分叉形態(tài)。

4.2 生化鑒定

過(guò)氧化氫酶試驗為陰性。選取純培養平板上的三個(gè)單個(gè)菌落，分別進(jìn)行生化反應檢測，不同雙歧桿菌菌種主要生化反應見(jiàn)國標附錄B。

5 有機酸代謝產(chǎn)物測定

氣相色譜法測定雙歧桿菌的有機酸代謝產(chǎn)物, 見(jiàn)國標附錄C。

6 報告

根據鏡檢及生化鑒定的結果(4)、雙歧桿菌的有機酸代謝產(chǎn)物乙酸與乳酸微摩爾之比大于1(5)，報告雙歧桿菌屬的種名。

相關(guān)國標下載地址：

GB 4789.34 —x 食品安全國家標準食品微生物學(xué)檢驗雙歧桿菌的鑒定

http://www.sveltematerialui.cn/show/28475.html

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