黃曲霉毒素檢測方法
發(fā)布時(shí)間：2024-12-09 瀏覽次數：1825
黃曲霉毒素在自然界中廣泛存在，對人和動(dòng)物會(huì )產(chǎn)生毒害，具有極強的致癌和致突變作用，在食品生產(chǎn)和農作物貯藏過(guò)程中比較常見(jiàn)。要想控制食品及農作物中黃曲霉毒素的含量，就必須充分了解黃曲霉毒素的結構及其特性。本文現就黃曲霉毒素的檢測方法、去除方法進(jìn)行總結。
1、黃曲霉毒素的檢測方法
1.1 薄層層析法
是一種少量、快速、便捷的檢測方法，既可以用于鑒定純凈物，又可以分離混合物，并提純和檢測其含量。其吸附原理主要是利用黃曲霉毒素B1的溶解性，將樣品提取濃縮后在薄層板上分離，于波長(cháng)356 nm處進(jìn)行紫外光照射，根據其薄層上顯示的熒光最低檢出量來(lái)測定其含。薄層層析法屬于最傳統的方法，但由于其操作步驟多、樣品前處理繁瑣，誤差非常大，已越來(lái)越不適合現代分析的要求。
1.2 高效液相色譜法
高效液相色譜法屬于色譜法的一種，它是利用樣品溶液里的幾種物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相中的分配系數不同，從而流出色譜柱的順序不同，進(jìn)而達到了分離的目的。這種方法優(yōu)點(diǎn)在于靈敏度很高、時(shí)間較短、適用于多種以及大量樣品的分析，一般在10～25 min之內就可以得到檢測結果，且樣品溶液和色譜柱都可以回收利用；但是此方法所需要的儀器較為先進(jìn)且昂貴，對技術(shù)的要求較高，故并沒(méi)有得到廣泛使用 。
1.3 酶聯(lián)免疫吸附法
酶聯(lián)免疫吸附法是基于抗原與抗體的特異性結合以及后續的霉對底物顯色反應的高效催化作用，在發(fā)生一系列的生理免疫反應后，通過(guò)儀器可檢測出被酶催化生成產(chǎn)物的量，進(jìn)而就可以計算出樣品中的抗體(或抗原)量。酶聯(lián)免疫吸附法是目前國際上認可的一種檢測黃曲霉毒素B1科學(xué)而有效的方法，并且還可以檢測乳制品里的黃曲霉毒素M1。該方法比較便利，檢測成本低廉、特異性強、靈敏度和效率也相對較高，是實(shí)驗室主要的檢測方法，也是國家標準的檢測方法之一。
1.4 金標試紙法
是利用疏水膠(又稱(chēng)膠體金)標記單克隆抗體而設計的定性或定量檢測方法。測檢樣品溶液里的黃曲霉毒素時(shí)，溶液中的黃曲霉毒素B1與試紙上的標記抗體相結合，使抗體的結合點(diǎn)被其所占據，進(jìn)而抑制了金標抗體與固相表面膜上的黃曲霉毒素B1偶聯(lián)物結合，使之沒(méi)有任何變化；相反，如果樣品溶液中沒(méi)有黃曲霉毒素B1，就不能阻止標記抗體與固相表面膜上的黃曲霉毒素B1偶聯(lián)物結合，從而就會(huì )產(chǎn)生顏色較深的色帶，呈紅色。此方法具有快速、方便、靈敏度較高等特點(diǎn)，準確度在85％以上，可以測出樣品中20 ng／g的黃曲霉毒素，一般在5～10 min就可以得到檢測結果 。
2、黃曲霉毒素的去除
2.1 理化去除法
（1）觀(guān)察挑選法。一般分布稻谷中的黃曲霉毒素大部分集中于稻殼層和谷皮、胚層，可以直接挑選出來(lái)，然后再進(jìn)行碾磨加工，可以去除其中的一大部分，但是這種方法比較耗費時(shí)間，在工業(yè)生產(chǎn)上很少使用。
（2）吸附法(挑選霉狀，磨粉吸附)。吸附法屬于一種物理方法，就是用多孔性的固體吸附劑將樣品里的雜質(zhì)吸附到其表面，從而使雜質(zhì)與所需要的樣品分離。在日常生活中和實(shí)驗室里常見(jiàn)的吸附劑有硅膠、氧化鋁、活性炭和焦炭等，一般活性炭的使用較為廣泛。水合鈉鈣硅酸鋁是最有效的吸附劑，已經(jīng)成功地用于吸附黃曲霉毒素B1。黃曲霉屬于微生物，少量黃曲霉產(chǎn)生的毒素聚集一起呈粉末狀，一般在花生油里常檢測到，由此可利用吸附劑吸除花生油里的大部分毒素，以膨潤土作為吸附劑吸附花生油里的黃曲霉毒素也有明顯的效果。有些黃曲霉毒素吸附劑含有中草藥，這種吸附劑可以同動(dòng)物飼料一同混合，動(dòng)物食用后對其肝臟具有保護作用，并能去除其體內殘留的黃曲霉毒素，對生長(cháng)具有促進(jìn)作用，且具有保健效果。
2.2 生物去除法
（1）乳酸菌黏附法。乳酸菌種類(lèi)繁多，有的乳酸菌對人體有利，如嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌等，都屬于有益菌，具有改善動(dòng)物腸道、促進(jìn)消化和生長(cháng)、增強自身免疫能力等功效。乳酸菌黏附法是通過(guò)乳酸菌自身黏附作用和其所分泌代謝產(chǎn)物的抑菌作用，在腸道內與其他厭氧菌共同形成生物學(xué)屏障，通過(guò)分泌有機酸和過(guò)氧化氫等物質(zhì)抑制病原菌，從而起到保護作用。
（2）其他微生物的去除黃曲霉毒素作用。生物學(xué)方法去毒是利用微生物(如食用菌、綠色木霉等)及其所產(chǎn)生的酶來(lái)去除毒素，使毒素降解失活，失去毒性作用。某些微生物可以吸附黃曲霉毒素，與黃曲霉毒素形成復合體，當微生物形成復合體后，自身的吸附能力會(huì )下降，就比較容易與黃曲霉毒素一起排出體外，從而降低毒素的危害。這種方法不需要用到其他的化學(xué)試劑，沒(méi)有污染并且效率較高，是理想的去毒方法。
參考文獻：[1]李昆,姚婷,寧雪雪,等.黃曲霉毒素的研究進(jìn)展[J].農產(chǎn)品加工：下, 2017(6):4.
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